Netiešais rifs. Seroloģiskie testi, izmantojot etiķeti

Pašlaik plaši tiek izmantoti seroloģiskie testi, kuros ir iesaistīti marķēti AG vai AT-la. Tie ietver imūnfluorescences, radioimūnās un enzīmu imūnanalīzes reakcijas.

Tie tiek piemēroti:

1) infekcijas slimību serodiagnostikai, t.i., antigēnu noteikšanai, izmantojot zināmu konjugētu (ķīmiski kombinētu) antigēnu komplektu ar dažādām etiķetēm (fermentiem, fluorohroma krāsvielām);

2) noteikt mikroorganismu vai tā serovaru, izmantojot standarta iezīmētās diagnostiskās antivielas (ekspresdiagnostika).

Serumus sagatavo, imunizējot dzīvniekus ar atbilstošu AG-m, pēc tam imūnglobulīnus izolē un konjugē ar gaismas krāsvielām (fluorohromiem), fermentiem un radioizotopiem.

Specifiskuma ziņā marķētie SR nav zemāki par citiem SR, un savā jutīgumā tie ir pārāki par visiem SR.

Nav saistīto materiālu

Kā etiķete tiek izmantotas gaismas fluorohroma krāsvielas (fluorisceīna izotiocianāts utt.).

Ir dažādas RIF modifikācijas. Infekcijas slimību ekspresdiagnostikai - mikrobu vai to antigēnu noteikšanai testa materiālā tiek izmantots RIF pēc Kūnsa.

Saskaņā ar Kūnsu ir divas RIF metodes: tiešā un netiešā.

Tiešie RIF komponenti:

1) pētāmais materiāls (zarnu kustība, nazofarneks utt.);

2) iezīmēts specifisks imūnserums, kas satur AT-la vēlamajam antigēnam;

3) izotonisks nātrija hlorīda šķīdums.

Testējamā materiāla uztriepi apstrādā ar marķētu antiserumu.

Notiek AG-AT reakcija. Luminiscences mikroskopiskās izmeklēšanas laikā zonā, kur lokalizēti AG-AT kompleksi, tiek konstatēta fluorescence - luminiscence.

Netiešās RIF sastāvdaļas:

1) pētāmais materiāls;

2) specifisks antiserums;

3) antiglobulīna serums (AT-la pret imūnglobulīnu), marķēts ar fluorihromu;

4) Izotoniskais nātrija hlorīda šķīdums.

Testējamā materiāla uztriepi vispirms apstrādā ar imūnserumu līdz vajadzīgajam antigēnam un pēc tam ar marķētu antiglobulīna serumu.

Kvēlojošie kompleksi AG-AT - marķēti AT tiek atklāti, izmantojot fluorescējošu mikroskopu.

Netiešās metodes priekšrocība ir tāda, ka nav nepieciešams sagatavot plašu specifisku fluorescējošu serumu klāstu, un tiek izmantots tikai viens fluorescējošs antiglobulīna serums.

Tiek izdalīta arī 4-komponentu netiešā RIF šķirne, ja papildus tiek ievadīts komplements (jūrascūciņas serums). Ar pozitīvu reakciju veidojas AG-AT - marķētā - AT-komplementa komplekss.

RIF pamatā ir baktēriju, riketsiju un vīrusu antigēnu apvienošana ar specifiskām antivielām, kas marķētas ar fluorescējošām krāsvielām (fluoresceīna izotiocianāts, rodamīns, B-izotianīts, lissatinrodamīns B-200, sulfohlorīds utt.), kurām ir reaktīvās grupas (sulfiocianīds utt.). )... Šīs grupas apvienojas ar antivielu molekulu brīvajām aminogrupām, kuras, apstrādājot ar fluorohromu, nezaudē specifisko afinitāti pret atbilstošo antigēnu. Izveidotie AG-AT kompleksi luminiscējošā mikroskopā kļūst par skaidri saskatāmām, spilgti mirdzošām struktūrām (7. att.). RIF var noteikt nelielu daudzumu baktēriju un vīrusu antigēnu. RIF metode tiek izmantota divās versijās: tiešā un netiešā metode.

Tiešā metode ir balstīta uz tiešu antigēna savienojumu ar iezīmētu antivielu. Netiešā metode ir balstīta uz AG-AT kompleksa pakāpenisku identificēšanu, izmantojot fluorescējošas krāsvielas. Pirmais posms sastāv no specifiska antigēna imūnkompleksu veidošanās ar specifiskām antivielām. Otrais posms ir šī kompleksa identificēšana, apstrādājot to ar iezīmētu antigammaglobulīnu.

RIF priekšrocības ir vienkāršība, augsta jutība, rezultāta iegūšanas ātrums. RIF izmanto kā metodi gripas, dizentērijas, malārijas, mēra, tularēmijas, sifilisa uc agrīnai ekspresdiagnostikai. Šādiem pētījumiem izmanto fluorescējošu mikroskopu.

Radioimūntests (RIA)

RIA ir viena no jutīgākajām imūndiagnostikas metodēm. To lieto, lai noteiktu B hepatīta vīrusa antigēnu pacientiem ar vīrusu hepatītu. Lai to izdarītu, testa serumam pievieno atsauces serumu (serumu, kas satur antivielas pret B hepatīta vīrusu). Maisījumu inkubē 1-2 dienas 40 °C temperatūrā, pēc tam pievieno atsauces antigēnu (antigēnu, kas iezīmēts ar izotopu 125 J) un inkubāciju turpina vēl 24 stundas. Izveidotajam antigēna-antivielu kompleksam tiek pievienoti nogulsnējoši anti-imūnglobulīni pret seruma etalonolbaltumvielām, kas noved pie nogulšņu veidošanās (8. att.). Rezultāts tiek ņemts vērā pēc impulsu klātbūtnes un skaita nogulsnēs, ko reģistrē skaitītājs. Ja pētāmajā serumā ir antigēns, kas saistās ar specifiskām antivielām, pēdējās nesaistās ar iezīmēto antigēnu un līdz ar to nogulsnēs netiek konstatēts. Tādējādi RIA pamatā ir nosakāmā antigēna un zināma iezīmētā antigēna daudzuma konkurētspējīgas mijiedarbības princips ar antivielu aktīvajiem centriem.Kā marķējums tiek izmantoti radioaktīvie izotopi.

Atkarībā no iestudēšanas tehnikas ir divi RIA veidi.

1) Tehnika "šķidrā fāze" (klasiskā RIA). Šīs inscenēšanas tehnikas trūkums ir nepieciešamība

īpaša brīvo un saistīto marķēto antigēnu (vai antivielu) atdalīšana.

2) Tehnika "cietā fāze".

Zināmas specifikas AG vai AT saistās uz sorbentiem (cietā fāze) - polistirola akas vai plastmasas mēģenes sieniņām. Pārējās IC sastāvdaļas tiek secīgi sorbētas uz imobilizētā AG (AT).

Atkarībā no reakcijas veida izšķir šādas metodes:

1) Konkurences metode - metode, kuras pamatā ir AG konkurence.

Reakcijas sastāvdaļas:

a) noteikts AH (pārbaudāmais materiāls - asinis, krēpas utt.);

b) ar radioizotopu iezīmēts antigēns, kas ir identisks pētītajam AG-y;

c) specifiska AT-la ar zināmu koncentrāciju, kas saistīta ar sorbentu;

d) standarta hipertensija (kontrole);

e) buferšķīdums.

Pirmkārt, reakcijā tiek ievadīts pētītais AG. AG-AT komplekss veidojas uz sorbenta virsmas. Sorbentu nomazgā, pēc tam ievada marķēto AG.Jo lielāks ir pētāmā AG saturs, jo mazāk iezīmētais AG saistās ar AT-m uz sorbenta virsmas. Iezīmētā AG koncentrāciju nosaka, mērot reakcijas radioaktivitāti, izmantojot skaitītājus. Radioaktivitātes daudzums reakcijā būs apgriezti proporcionāls AG daudzumam testa paraugā.

2) Nekonkurējoša metode.

Reakcijas sastāvdaļas:

a) noteikts AG;

b) specifiska zināmas koncentrācijas AT-a, saistīta

ny uz sorbenta;

c) antivielas, kas ir identiskas saistītajai antivielai, marķētas

radioizotopu;

d) standarta AG;

e) buferšķīdums.

Pārbaudes AG tiek pievienota saistītajiem AT. Inkubācijas procesā uz sorbenta veidojas AG-AT kompleksi. Sorbentu nomazgā no brīvajiem komponentiem un pievieno marķētās AT, kas saistās ar AG-on brīvajām valencēm kompleksā. Radioaktivitātes daudzums ir proporcionāls pētāmās AG koncentrācijai.

3) "Sendviča metode" (netiešā metode) - visizplatītākā metode.

Sastāvdaļas:

a) izmeklētais serums (vai izmeklētais AG);

b) AG-s, kas saistīts ar sorbentu (vai AT-la, kas saistīts ar sorbentu, nosakot AG-a);

c) diagnostiskās antivielas pret imūnglobulīniem, kas marķētas ar radioizotopiem;

d) kontroles serumi (vai AG);

e) buferšķīdumi.

Izpētītās antiglobulīna antivielas (vai antigēni) reaģē ar cietās fāzes antigēniem (antivielām), pēc tam tiek noņemts inkubāts un reakcijā tiek ievadītas iezīmētās antiglobulīna antivielas, kas saistās ar specifiskiem antiglobulīna antivielu kompleksiem uz sorbenta virsmas. Radioaktivitātes daudzums reakcijā ir tieši proporcionāls pētāmā AT (vai AG) daudzumam.

RIA priekšrocības:

1) augsta specifika un jutīgums;

2) iestudējuma tehnikas vienkāršība;

3) rezultātu kvantitatīvā novērtējuma precizitāte;

4) viegli pielāgojams automatizācijai.

Trūkums: radioaktīvo izotopu izmantošana.

Nav saistītu materiālu (

Imūntesta metode (ELISA)

Metode tiek izmantota antigēnu noteikšanai, izmantojot atbilstošās antivielas, kas konjugētas ar tagu enzīmu (mārrutku peroksidāzi, b - galaktozi vai sārmaino fosfatāzi). Pēc antigēna apvienošanas ar enzīmu iezīmēto imūnserumu maisījumam pievieno substrātu un hromogēnu. Substrātu šķeļ ferments, un tā sadalīšanās produkti izraisa hromogēna ķīmisko modifikāciju. Šajā gadījumā hromogēns maina savu krāsu – krāsas intensitāte ir tieši proporcionāla piesaistīto antigēnu un antivielu molekulu skaitam (9. att.).

Visizplatītākā ir cietās fāzes ELISA, kurā viens no imūnās atbildes komponentiem (antigēns vai antiviela) tiek sorbēts uz cieta nesēja. Polistirola mikropaneļi tiek izmantoti kā ciets nesējs. Nosakot antivielas, iedobēm ar sorbēto antigēnu secīgi pievieno pacientu asins serumu, ar enzīmu marķētu antiglobulīna serumu un enzīma un hromogēna substrāta šķīdumu maisījumu. Katru reizi pēc nākamā komponenta pievienošanas nesaistītie reaģenti tiek noņemti no iedobēm, rūpīgi mazgājot. Ja rezultāts ir pozitīvs, hromogēna šķīduma krāsa mainās. Cietās fāzes nesēju var sensibilizēt ne tikai ar antigēnu, bet arī ar antivielu. Pēc tam iedobēm ar adsorbētām antivielām pievieno vajadzīgo antigēnu, pievieno ar enzīmu iezīmēto imūnserumu pret antigēnu un pēc tam fermenta substrāta un hromogēna šķīdumu maisījumu.

ELISA izmanto vīrusu un baktēriju patogēnu izraisītu slimību diagnosticēšanai.Kā etiķete tiek izmantoti fermenti: peroksidāze, sārmainā fosfatāze u.c.

Reakcijas indikators ir enzīmu spēja izraisīt krāsu reakcijas, ja tie tiek pakļauti atbilstošam substrātam. Piemēram, ortofenildiamīna šķīdums ir peroksidāzes substrāts.

Visplašāk izmantotais cietās fāzes ELISA. ELISA būtība ir līdzīga RIA būtībai.

ELISA rezultātus var novērtēt vizuāli un mērot optisko blīvumu ar spektrofotometru.

ELISA priekšrocības ietver:

Kontakta trūkums ar radioaktīvām vielām;

Atbildes novērtēšanas metožu vienkāršība;

konjugātu stabilitāte;

Viegli pielāgojams automatizācijai.

Tomēr, salīdzinot ar RIA, tiek atzīmēta zemāka metodes jutība, bet dažos gadījumos jutība pārsniedz RIF un RIM.

Kā piemēri ir sniegti šādi ELISA veidi:

Konkurētspējīgs tips.

Pieraksts.

Paredzēts B hepatīta vīrusa (HB3 Ad) virsmas antigēna noteikšanai serumā un plazmā, diagnosticējot vīrusu B hepatītu un lai noteiktu HB5 Ad pārnēsāšanu.

Sastāvdaļas:

1) testa materiāla serumu vai asins plazmu;

2) antivielas pret HBs Ad, adsorbētas uz polistirola mikroplates iedobes virsmas;

3) konjugāts — peles monoklonālās antivielas pret HBs Ad, kas marķētas ar peroksidāzi,

4) ortofenilēndiamīna (OFD) -substrāts;

5) fosfātu buferšķīdums;

6) kontroles serumi:

Pozitīvs (serums ar HBe Ad);

Negatīvs (serums bez HBs reklāmas). Progress

1) Kontroles un testa serumu ieviešana.

2) Inkubācija 1 stundu 37 ° C temperatūrā.

3) Aku mazgāšana.

4) Konjugāta ievadīšana.

5) Inkubācija 1 stundu 37 ° C temperatūrā.

6) Aku mazgāšana.

7) Ievadot OFD. HBz Ad klātbūtnē šķīdums iedobēs kļūst dzeltens.

ELISA uzskaiti veic pēc optiskā blīvuma, izmantojot fotometru. Optiskā blīvuma pakāpe būs apgriezti proporcionāla pētāmā НВз Аd koncentrācijai.

Mehānisms

Reakcija notiek trīs fāzēs:

1) Pētītā seruma (plazmas) HBs Ad saistās ar homologām antivielām, kas adsorbētas uz iedobes virsmas. Izveidojas IC AG-AT. (NVz Ad - sin \ NVz AT).

2) Antivielas HBs Ad, kas marķētas ar peroksidāzi, saistās ar atlikušajiem brīvajiem AG-AT kompleksa HBs Ad determinantiem. Veidojas komplekss ar AT-AG iezīmētu AT (an! 1 HBs AT-HBs Ad-ap (1 HBs AT, marķēts ar peroksidāzi).

3) OPD mijiedarbojas (ar peroksidāzi) ar AT-AG-AT kompleksu un rodas dzeltena krāsa.

Netiešais veids

Tā ir galvenā testa reakcija HIV infekcijas diagnosticēšanai.

Mērķis: HIV infekcijas seroloģiskā diagnostika - HIV antigēnu antivielu noteikšana, Sastāvdaļas:

1) testa materiāls - asins serums;

2) sintētiskais

Šī metode izmanto luminiscences fenomenu.

Luminiscences fenomena būtība slēpjas apstāklī, ka, dažu vielu molekulām absorbējot dažāda veida enerģiju (gaismu, elektrisko utt.), to atomi pāriet ierosinātā stāvoklī un pēc tam, atgriežoties sākotnējā stāvoklī, atbrīvot absorbēto enerģiju gaismas starojuma veidā.

RIF luminiscence izpaužas fluorescences veidā - tas ir mirdzums, kas rodas apstarošanas brīdī ar aizraujošu gaismu un apstājas tūlīt pēc tā izbeigšanās.

Daudzām vielām un dzīviem mikroorganismiem ir sava fluorescence (tā sauktā primārā), taču tās intensitāte ir ļoti zema. Vielas ar intensīvu primāro fluorescenci un ko izmanto, lai piešķirtu fluorescējošas īpašības nefluorescējošām vielām, sauc par fluorohromiem. Šo inducēto fluorescenci sauc par sekundāro fluorescenci.

Fluorescences ierosināšanai fluorescences mikroskopijā visbiežāk izmanto ultravioleto vai zili violeto spektra daļu (viļņa garums 300-460 nm). Šiem nolūkiem laboratorijās ir dažādu modeļu fluorescējošie mikroskopi - ML-1-ML-4, "Lumam".

Viroloģiskajā praksē tiek izmantotas divas galvenās fluorescences mikroskopijas metodes: fluorohromācija un fluorescējošās antivielas (vai RIF).

Fluorohromācija- Tā ir preparātu apstrāde ar fluorohromu, lai palielinātu to luminiscences stiprumu un kontrastu. Vislielāko interesi rada akridīna oranžais fluorohroms, kas inducē nukleīnskābju polihromatisko fluorescenci. Tātad, apstrādājot zāles ar šo fluorohromu, dezoksiribonukleīnskābe spilgti fluorescē zaļā krāsā, bet ribonukleīnskābe - rubīna sarkanā krāsā.

RIF metode sastāv no tā, ka antivielas, kas savienotas ar fluorohromu, saglabā spēju izveidot specifisku saiti ar homologu antigēnu. Iegūtais antigēna + antivielu komplekss fluorohroma klātbūtnes dēļ tiek noteikts luminiscējošā mikroskopā ar tā raksturīgo mirdzumu.

Antivielu iegūšanai tiek izmantoti ļoti aktīvi hiperimūnie serumi, no kuriem tiek izolētas antivielas un marķētas ar fluorohromu. Visbiežāk izmantotais fluorohroms ir FITC-fluoresceīna izotiocianāts (zaļš mirdzums) un PCX-rodamīna sulfohlorīds (sarkans mirdzums). Ar fluorohromu iezīmētās antivielas sauc par konjugātiem.

Preparātu sagatavošanas un krāsošanas metode ir šāda:

• sagatavot uztriepes, orgānu nospiedumus vai segstikliņus - inficētu šūnu kultūru uz stikla priekšmetstikliņiem; jūs varat arī izmantot histosekciju;
• preparātus žāvē gaisā un fiksē atdzesētā acetonā istabas temperatūrā vai mīnus 15 ° C (no 15 minūtēm līdz 4-16 stundām);
• krāsots ar tiešu vai netiešu metodi; veikt uzskaiti luminiscējošā mikroskopā atbilstoši luminiscences intensitātei, kas novērtēta krustiņos.

Tajā pašā laikā tiek sagatavoti un iekrāsoti preparāti no vesela dzīvnieka - kontrole.

Ir divas galvenās fluorescējošu antivielu izmantošanas metodes: tiešā un netiešā.

Tiešā metode (viens solis)... Fiksētajam preparātam tiek uzklāts konjugāts (fluorescējošs serums pret iespējamo vīrusu), inkubēts 30 minūtes 37 °C mitrā kamerā. Pēc tam preparātu mazgā no nesaistītā konjugāta ar fizioloģisko šķīdumu (pH 7,2 - 7,5), žāvē gaisā, uzklāj ar nefluorescējošu eļļu un pārbauda mikroskopā.

Tiešā metode ļauj noteikt un identificēt antigēnu. Lai to izdarītu, katram vīrusam ir jābūt fluorescējošam serumam.

Netiešā metode (divpakāpju)... Fiksētajam preparātam tiek uzklāts nemarķēts serums, kas satur antivielas pret iespējamo vīrusu, inkubēts 30 minūtes 37 ° C temperatūrā, nesaistītās antivielas tiek nomazgātas. Preparātam tiek uzklāts fluorescējošs pretsugu serums, kas atbilst dzīvnieka tipam - homologu pretvīrusu antivielu ražotājam, inkubēts 30 minūtes 37 ° C temperatūrā. Pēc tam preparātu mazgā no nesaistītajām iezīmētajām antivielām, žāvē gaisā, uzklāj ar nefluorescējošu eļļu un pārbauda fluorescējošā mikroskopā.

Pretvīrusu serumus iegūst, imunizējot dzīvniekus ar to sugu globulīniem, kas kalpo kā pretvīrusu antivielu ražotāji. Tātad, ja uz trušiem tika iegūtas pretvīrusu antivielas, tad tiek izmantots fluorescējošs prettrušu serums.

Netiešā metode ļauj ne tikai atklāt un identificēt antigēnu, bet arī atklāt un noteikt antivielu titru. Turklāt šī metode var noteikt dažādu vīrusu antigēnus ar vienu marķētu serumu, jo tā ir balstīta uz pretsugu serumu izmantošanu. Biežāk tiek lietots prettrušu, pret liellopu, pret zirgu serums un pret jūrascūciņu globulīna serums.

Ir izstrādātas vairākas netiešās metodes modifikācijas. Ievērības cienīgākā ir komplementa metode. Metode ietver inaktivēta nefluorescējoša specifiska seruma un jūrascūciņas komplementa uzklāšanu fiksētajam preparātam, inkubāciju 30 minūtes 37 °C temperatūrā, mazgāšanu un fluorescējoša antikomplementāra seruma uzklāšanu, lai noteiktu antigēna + antivielas + komplementa kompleksu, inkubāciju 30 minūtes 37 ° C temperatūrā, mazgā, žāvē gaisā un pārbauda fluorescējošā mikroskopā.

RIF priekšrocības: augsta specifika un jutīgums; iestudējuma tehnikas vienkāršība; nepieciešams minimālais sastāvdaļu skaits. Šī ir ātrā diagnostikas metode, jo atbildi varat saņemt dažu stundu laikā. Trūkumi ietver subjektivitāti, novērtējot spīduma intensitāti, un diemžēl dažreiz fluorescējošie serumi ir sliktas kvalitātes. Pašlaik RIF plaši izmanto vīrusu slimību diagnostikā dzīvniekiem.

Ja atrodat kļūdu, lūdzu, atlasiet teksta daļu un nospiediet Ctrl + Enter.

Imunofluorescences metode (RIF, imunofluorescences reakcija, Kūnsa reakcija) ir metode specifiska Ar noteikšanai, izmantojot Ab konjugētu ar fluorohromu. Piemīt augsta jutība un specifiskums.

To izmanto infekcijas slimību ekspresdiagnostikai (patogēna identifikācijai pētāmajā materiālā), kā arī Ab un virsmas receptoru un leikocītu marķieru noteikšanai (imūnfenotipizēšanai) un citām šūnām.

Diagnostikas praksē plaši tiek izmantota baktēriju un vīrusu antigēnu noteikšana infekcijas materiālos, dzīvnieku audos un šūnu kultūrās, izmantojot fluorescējošas antivielas (serumus). Fluorescējošo serumu sagatavošana balstās uz dažu fluorohromu (piemēram, fluoresceīna izotiocianāta) spēju ķīmiski saistīties ar sūkalu proteīniem, neietekmējot to imunoloģisko specifiku.

Ir trīs metodes veidi: tieša, netieša, ar komplementu. Tiešā RIF metode ir balstīta uz to, ka audu antigēni vai mikrobi, kas apstrādāti ar imūnserumu ar antivielām, kas iezīmētas ar fluorohromiem, spēj mirdzēt fluorescējošā mikroskopa UV staros. Baktērijas uztriepē, kas apstrādātas ar šādu luminiscējošu serumu, mirdz gar šūnas perifēriju zaļas apmales veidā.

Netiešā RIF metode sastāv no antigēna-antivielu kompleksa noteikšanas, izmantojot antiglobulīna (pret antivielām) serumu, kas marķēts ar fluorohromu. Šim nolūkam uztriepes no mikrobu suspensijas apstrādā ar pretmikrobu trušu diagnostikas seruma antivielām. Pēc tam antivielas, kas nav saistījušas mikrobu antigēnus, tiek nomazgātas, bet uz mikrobiem palikušās antivielas tiek atklātas, apstrādājot uztriepi ar antiglobulīna (prettruša) serumu, kas marķēts ar fluorohromiem. Rezultātā veidojas mikrobu + pretmikrobu trušu antivielu + anti-trušu antivielu komplekss, kas marķēts ar fluorohromu. Šis komplekss tiek novērots fluorescējošā mikroskopā, tāpat kā tiešajā metodē.

Mehānisms. No testa materiāla uztriepi sagatavo uz priekšmetstikliņa, fiksē uz liesmas un apstrādā ar imūno truša serumu, kas satur antivielas pret patogēna antigēniem. Lai izveidotu antigēna-antivielu kompleksu, zāles ievieto mitrā kamerā un inkubē 37 ° C temperatūrā 15 minūtes, pēc tam tās rūpīgi nomazgā ar izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu, lai noņemtu antivielas, kas nav saistītas ar antigēnu. Pēc tam preparātam tiek uzklāts fluorescējošais antiglobulīna serums pret trušu globulīniem, 15 minūtes tiek turēts 37 ° C temperatūrā, un pēc tam preparātu rūpīgi nomazgā ar izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu. Fluorescējošā antiglobulīna seruma saistīšanās rezultātā ar specifiskām antivielām, kas fiksētas uz antigēna, veidojas gaismas antigēna-antivielu kompleksi, kurus nosaka ar luminiscences mikroskopiju.

4. Bērnistabas guļamistabas gaisā konstatēti 75 mt/m3 streptokoku, 12 mt/m3 stafilokoku un 1 mt/m3 tuberkulozes baktēriju. Sniedziet gaisa sanitāro un bakterioloģisko novērtējumu un izklāstiet tā reorganizācijas plānu.

EKSĀMENU BIĻETE Nr._54

Retrovīrusi. HIV infekcija (AIDS) un tās izraisītāji.

Cilvēka imūndeficīta vīruss izraisa HIV infekciju, kā rezultātā attīstās iegūtais imūndeficīta sindroms.

HIV infekcijas izraisītājs ir limfotrops vīruss, kas pieder Retroviridae dzimtai, Lentivirus ģints.

Morfoloģiskās īpašības: RNS saturošs vīruss. Sfēriska vīrusa daļiņa Apvalks sastāv no dubultā lipīdu slāņa, kas caurstrāvo glikoproteīnus. Lipīdu membrāna nāk no saimniekšūnas plazmas membrānas, kurā vīruss vairojas. Glikoproteīna molekula sastāv no 2 apakšvienībām, kas atrodas uz viriona virsmas un iekļūst tā lipīdu membrānā.

Vīrusa kodols ir konusa formas un sastāv no kapsīdu proteīniem, vairākiem matricas proteīniem un proteāzes proteīniem. Genoms veido divas RNS virknes; reprodukcijas procesam HIV ir reversā transkriptāze vai reversā transkriptāze.

Vīrusa genoms sastāv no 3 galvenajiem strukturālajiem gēniem un 7 regulējošiem un funkcionāliem gēniem. Funkcionālie gēni veic regulēšanas funkcijas un nodrošina reproduktīvo procesu īstenošanu un vīrusa līdzdalību infekcijas procesā.

Vīruss galvenokārt skar T- un B-limfocītus, dažas monocītu sērijas šūnas (makrofāgi, leikocīti), nervu sistēmas šūnas.

Kultūras īpašības: uz T-limfocītu un cilvēka monocītu šūnu kultūru (IL-2 klātbūtnē).

Antigēna struktūra: 2 vīrusu veidi - HIV-1 un HIV-2 HIV-1, ir vairāk nekā 10 genotipi (apakštipi): A, B, C, D, E, F ..., kas atšķiras ar aminoskābju sastāvu olbaltumvielas.

HIV-1 iedala 3 grupās: M, N, O. Lielākā daļa izolātu pieder M grupai, kurā izšķir 10 apakštipus: A, B, C, D, Fl, F-2, G, H, I, K. Izturība: jutīga pret fizikāliem un ķīmiskiem faktoriem, karsējot mirst. Vīruss var ilgstoši pastāvēt izžuvušajā stāvoklī, izžuvušajās asinīs.

Patogenitātes faktori, patoģenēze: vīruss piesaistās limfocītam, iekļūst šūnā un vairojas limfocītā. HIV pavairošanas rezultātā limfocītos pēdējie tiek iznīcināti vai zaudē funkcionālās īpašības. Vīrusa vairošanās rezultātā dažādās šūnās tas uzkrājas orgānos un audos, un tas ir atrodams asinīs, limfā, siekalās, urīnā, sviedros un izkārnījumos.

HIV infekcijas gadījumā samazinās T-4 limfocītu skaits, tiek traucēta B limfocītu funkcija, tiek nomākta dabisko killer šūnu darbība un samazināta reakcija uz antigēniem, kā arī komplementa, limfokīnu un citu imūnfunkcijas regulējošu faktoru ražošana ( IL) ir traucēta, kā rezultātā rodas imūnsistēmas disfunkcija.sistēmas.

Klīnika: tiek ietekmēta elpošanas sistēma (pneimonija, bronhīts); Centrālā nervu sistēma (abscesi, meningīts); Notiek kuņģa-zarnu trakta (caureja), ļaundabīgi audzēji (iekšējo orgānu audzēji).

HIV infekcija norit vairākos posmos: 1) inkubācijas periods, vidēji 2-4 nedēļas; 2) primāro izpausmju stadija, ko sākotnēji raksturo akūts drudzis, caureja; stadija beidzas ar asimptomātisku fāzi un vīrusa noturību, labsajūtas atjaunošanos, tomēr HIV antivielas tiek noteiktas asinīs, 3) sekundāro slimību stadija, kas izpaužas ar elpošanas un nervu sistēmas bojājumiem. HIV infekcija beidzas ar pēdējo, 4. terminālo stadiju – AIDS.

Mikrobioloģiskā diagnostika.

Virusoloģiskie un seroloģiskie pētījumi ietver metodes HIV antigēnu un antivielu noteikšanai. Šim nolūkam izmanto ELISA, IB un PCR. HIV-1 un HIV-2 pacientu serumi satur antivielas pret visiem vīrusu proteīniem. Taču, lai apstiprinātu diagnozi, tiek noteiktas antivielas pret gp41, gpl20, gpl60, p24 proteīniem HIV-1 un antivielas pret gp36, gpl05, gpl40 proteīniem HIV-2. HIV antivielas parādās 2-4 nedēļas pēc inficēšanās un tiek konstatētas visos HIV posmos.

Vīrusa noteikšanas metode asinīs, limfocītos. Tomēr jebkura pozitīva parauga gadījumā tiek iestatīta IB reakcija, lai apstiprinātu rezultātus. Tiek izmantota arī PCR, kas spēj noteikt HIV infekciju inkubācijas un agrīnā klīniskā periodā, taču tā jutība ir nedaudz zemāka nekā ELISA.

Klīniskās un seroloģiskās diagnozes apstiprina imunoloģiskie pētījumi, ja tie norāda uz imūndeficīta klātbūtni izmeklētajā pacientā.

Diagnostikas ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests HIV antivielu noteikšanai - ietver vīrusu antigēnus, kas adsorbēti uz nesēja, antivielas pret cilvēka Ig. Lieto AIDS serodiagnostikai.

Ārstēšana: reversās transkriptāzes inhibitoru lietošana aktivētās šūnās. Zāles ir timidīna atvasinājumi - azidotimidīns un fosfazīds.

Profilakse. Konkrēti - nē.

Fizikālo un ķīmisko faktoru ietekme uz mikrobiem. Mutācija un to nozīme praktiskajā medicīnā. Piemēri. Ekoloģijas nozīme.

Ķīmisko un bioloģisko faktoru darbība.

Ķīmisko vielu darbība

Ķīmiskās vielas var kavēt vai pilnībā kavēt mikroorganismu augšanu. Ja ķīmiskā viela kavē baktēriju augšanu, bet pēc izņemšanas to augšana atsāk.

Pretmikrobu vielas, ņemot vērā ķīmisko struktūru un to baktericīdās iedarbības mehānismu pret baktērijām, var iedalīt šādās grupās: oksidanti, halogēni, metālu savienojumi, skābes un sārmi, virsmaktīvās vielas, spirti, krāsvielas, fenola un formaldehīda atvasinājumi.

Oksidētāji. Šajā grupā ietilpst ūdeņraža peroksīds un kālija permanganāts.

Halogēni. Hlors, jods un to preparāti: balinātājs, hloramīns B, pantocīds, spirta joda šķīdums 5%, jodinols, jodoforms.

Smago metālu savienojumi (svina, vara, cinka, sudraba, dzīvsudraba sāļi; sudraba metālorganiskie savienojumi: protargols, kolargols). Šie savienojumi spēj radīt gan pretmikrobu, gan dažādu lokālu iedarbību uz makroorganisma audiem.

Skābes un sārmi. Skābju un sārmu baktericīda iedarbība balstās uz mikroorganismu dehidratāciju, barības vides pH izmaiņām, koloidālo sistēmu hidrolīzi un skābu vai sārmainu albuminātu veidošanos.

Krāsvielām ir spēja kavēt baktēriju augšanu. Viņi darbojas lēni, bet selektīvāk.

Formaldehīds ir bezkrāsaina gāze. Praksē tiek izmantots 40% formaldehīda (formalīna) ūdens šķīdums. Ūdenī izšķīdinātais gāzveida formaldehīds kaitīgi iedarbojas uz baktēriju veģetatīvām un sporu formām.

Bioloģisko faktoru darbība

Bioloģisko faktoru darbība izpaužas galvenokārt mikrobu antagonismā, kad dažu mikrobu atkritumi izraisa citu nāvi.

Antibiotikas (no grieķu anti - pret, bios - dzīvība) ir bioloģiski aktīvas vielas, kas veidojas sēnīšu, baktēriju, dzīvnieku, augu dzīves laikā un radītas sintētiski un spēj selektīvi nomākt un nogalināt mikroorganismus, sēnītes, riketsijas, lielos vīrusus, vienšūņus un atsevišķi helminti.

3. Baktēriju enzīmu bioloģiskās aktivitātes reakcija reimatisma gadījumā, diagnostiskā un praktiskā vērtība, antivielu aizsargājošā loma pret enzīmiem iegūtajā imunitātē (antihialuronidāzes un anti-O-streptolizīna noteikšana).

Reimatisms ir izplatīta infekcioza un alerģiska rakstura slimība, kurā tiek skarti saistaudi, galvenokārt sirds un asinsvadu sistēma, kā arī locītavas, iekšējie orgāni un centrālā nervu sistēma. Tiek uzskatīts, ka reimatisma attīstības cēlonis ir patogēno mikroorganismu, galvenokārt beta-hemolītisko streptokoku A grupas, aktivizēšanās. Tieši viņam ir piešķirta galvenā loma reimatisko slimību etioloģijā un patoģenēzē. Pirmkārt, slimība attīstās uz streptokoku infekcijas fona. Otrkārt, pacientu asinīs tiek konstatēts liels daudzums antivielu pret šīs grupas mikroorganismiem. Treškārt, slimības profilakse tiek veiksmīgi veikta ar antibakteriāliem līdzekļiem.

Reimatoīdā artrīta gadījumā sinoviālās membrānas nezināmu iemeslu dēļ izdala lielu daudzumu enzīma glikozes-6-fosfāta dehidrogenāzes, kas arī sadala disulfīda saites šūnu membrānā. Šajā gadījumā notiek proteolītisko enzīmu "noplūde" no šūnu lizosomām, kas izraisa blakus esošo kaulu un skrimšļu bojājumus. Ķermenis reaģē uz to, ražojot citokīnus, starp kuriem ir arī audzēja nekrozes faktors α TNF-α. Reakciju kaskādes šūnās, ko izraisa citokīni, vēl vairāk pastiprina slimības simptomus. Hronisks reimatoīdais iekaisums, kas saistīts ar TNF-α, ļoti bieži izraisa skrimšļa un locītavu bojājumus, izraisot fizisku invaliditāti.

61. Imunofluorescences reakcija. Mehānisms, sastāvdaļas, pielietojums. Tiešās un netiešās inscenēšanas metodes.

Ir trīs galvenie metodes veidi: tiešā, netiešā (13.10. att.), ar komplementu. Kūnsa reakcija ir ātra diagnostikas metode mikrobu antigēnu noteikšanai vai antivielu noteikšanai.

Tiešā RIF metode pamatojoties uz to, ka audu antigēni vai mikrobi, kas apstrādāti ar imūnserumu ar antivielām, kas iezīmētas ar fluorohromiem, spēj mirdzēt luminiscējošā mikroskopa UV staros.. Ar šādu luminiscējošu serumu apstrādātā uztriepē baktērijas mirdz gar šūnas perifēriju kā zaļā robeža.

Netiešā RIF metode sastāv no antigēna-antivielu kompleksa identificēšanas, izmantojot antiglobulīna (pret antivielām) serumu, kas marķēts ar fluorohromu. Šim nolūkam uztriepes no mikrobu suspensijas apstrādā ar pretmikrobu trušu diagnostikas seruma antivielām. Pēc tam antivielas, kas nav saistījušas mikrobu antigēnus, tiek nomazgātas, bet uz mikrobiem palikušās antivielas tiek atklātas, apstrādājot uztriepi ar antiglobulīna (prettruša) serumu, kas marķēts ar fluorohromiem. Rezultātā veidojas mikrobu + pretmikrobu trušu antivielu + anti-trušu antivielu komplekss, kas marķēts ar fluorohromu. Šis komplekss tiek novērots fluorescējošā mikroskopā, tāpat kā tiešajā metodē.

Kā etiķete tiek izmantotas gaismas fluorohroma krāsvielas (fluorisceīna izotiocianāts utt.).

Ir dažādas RIF modifikācijas. Infekcijas slimību ekspresdiagnostikai - mikrobu vai to antigēnu noteikšanai testa materiālā tiek izmantots RIF pēc Kūnsa.

Saskaņā ar Kūnsu ir divas RIF metodes: tiešā un netiešā.

Tiešie RIF komponenti:
1) pētāmais materiāls (zarnu kustība, nazofarneks utt.);
2) iezīmēts specifisks imūnserums, kas satur AT-la vēlamajam antigēnam;
3) izotonisks nātrija hlorīda šķīdums.
Testējamā materiāla uztriepi apstrādā ar marķētu antiserumu.
Notiek AG-AT reakcija. Luminiscences mikroskopiskās izmeklēšanas laikā zonā, kur lokalizēti AG-AT kompleksi, tiek konstatēta fluorescence - luminiscence.

Netiešās RIF sastāvdaļas:
1) pētāmais materiāls;
2) specifisks antiserums;
3) antiglobulīna serums (AT-la pret imūnglobulīnu), marķēts ar fluorihromu;
4) Izotoniskais nātrija hlorīda šķīdums.

Testējamā materiāla uztriepi vispirms apstrādā ar imūnserumu līdz vajadzīgajam antigēnam un pēc tam ar marķētu antiglobulīna serumu.

Kvēlojošie kompleksi AG-AT - marķēti AT tiek atklāti, izmantojot fluorescējošu mikroskopu.
Netiešās metodes priekšrocība ir tāda, ka nav nepieciešams sagatavot plašu specifisku fluorescējošu serumu klāstu, un tiek izmantots tikai viens fluorescējošs antiglobulīna serums.

Tiek izdalīta arī 4-komponentu netiešā RIF šķirne, ja papildus tiek ievadīts komplements (jūrascūciņas serums). Ar pozitīvu reakciju veidojas AG-AT - marķētā - AT-komplementa komplekss.

Satura rādītājs:

Tiešie veidi

Tumšā lauka mikroskopija

Bālas treponēmas nevar augt uz barības vielu barotnēm un netiek vizualizētas gaismas mikroskopā. Tā kā patogēna noteikšana ar parasto mikroskopiju nav iespējama, tiek izmantots īpašs mikroskops ar tumšu lauku, kur patogēns ir redzams spirāles veidā uz tumša fona.

Mikroskopijai tiek ņemts biomateriāls no bojājuma, kas ir aizdomīgs par slimību. Darkfield mikroskopija ir iespējams veids, kā novērtēt ādas bojājumus, piemēram, primārā sifilisa vai sekundārā sifilisa kondilomas. Ja makulopapulārā fokusa materiāls ir sauss, tiek pārbaudīts limfmezglu aspirāts.

Negatīvs rezultāts neizslēdz patoloģisku procesu, statistiski identificēt patogēnu iespējams tikai 80%.

PCR diagnostika

Reakcija, kuras mērķis ir vairākkārt palielināt treponema pallidum DNS, ļauj izdarīt secinājumu par inficēšanos ar sifilisu vai tā neesamību.

Jebkurš biomateriāls analīzei var būt: asinis, sifilīda saturs, cerebrospinālais šķidrums utt. Tests ir piemērots inkubācijas periodam.

PCR ir pilnīgi specifisks.

Netiešā seroloģiskā pārbaude sifilisa noteikšanai: treponēmas un netreponēmas testi

Seroloģiskie testi (DAC vai seroloģisko reakciju komplekss) tiek uzskatīti par visizplatītāko veidu, kā diagnosticēt visas sifilisa stadijas. Izšķir šādas reakcijas:

• aglutinācija;
• nokrišņi;
• imunofluorescence;
• enzīmu imūntests utt.

Arī seroloģiskie testi sifilisa noteikšanai tiek iedalīti treponēmālajos un netreponemālajos.

Ne-treponēma

Ja ir aizdomas par iegūto sifilisu, tiek veikta skrīninga pārbaude, kurai viņi izmanto ne-treponēmas testi antivielu noteikšana pret saimnieka vai patogēna audu lipoīdu antigēniem dažādās modifikācijās. Krievijas Federācijā regulāri tiek veikta mikroprecipitācijas reakcija (RMP), kas ļauj noteikt antivielas pret patogēna bojātajām šūnām asinīs. Skrīninga ticamība ir augsta, bet specifiskums ir zems, tāpēc testēšana ir piemērota primārajai masveida skrīningam profilaktiskos nolūkos.

Ātro testu jutīgums tiek lēsts 78-86% primārā sifilisa gadījumā, 100% sekundārajam sifilisam un 95-98% terciārajam sifilisam.

Specifiskums - no 85-99%, dažreiz mazāk, kas rodas šādos apstākļos:

• grūtniecība;
• menstruācijas;
• onkoloģija;
• saistaudu slimības;
• vīrusu slimības;
• aknu slimība;
• vakcinācija;
• "Svaigs" MI;
• tīfs utt.

Turklāt pārmērīgs tauku daudzums uzturā, alkoholisko dzērienu dzeršana un noteiktu medikamentu lietošana var izraisīt kļūdaini pozitīvu rezultātu.

Skrīninga testa rezultāti kļūst pozitīvi 1-2 nedēļas pēc šankra veidošanās. Testi, kas nav saistīti ar treponēmu, kādu laiku pēc ārstēšanas ir negatīvi. HIV statusā netreponēmas antivielas var konstatēt ilgstoši, dažreiz visu mūžu (ko apstiprina atbilstoša randomizēta pētījuma rezultāti).

Citi ne-treponēmu testu veidi: VDRL, plazmoreagīna tests (RPR), toluidīna sarkanais tests, kardiolipīna antigēna komplementa saistīšanās tests (CACk).

Vasermana reakcija (RW)

Komplementa saistīšanās ir imūnsistēmas reakcija uz infekciju, rezultāts svārstās no negatīva (ielieciet "-") līdz krasi pozitīvam "++++" jeb 4 plusi.

Sākotnējā primārā sifilisa stadijā RW ir negatīvs.

Treponemāls

Tā kā viltus pozitīvie rezultāti var apstiprināt jebkuru pozitīvu vai nepārprotamu netreponēmas testa rezultātu, izmantojiet treponēmas testi:

• imunofluorescences reakcija (RIF);
• hemaglutinācija (RPHA),
• ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA) G klases imūnglobulīnu (IgG) un imūnglobulīna M (IgM) noteikšanai;
• imūnblotēšana;
• RIBT / RIT (bālas treponēmas imobilizācijas reakcija).

Treponēmas testi netiek izmantoti, lai novērtētu terapijas efektivitāti.

RIF IgG klases treponēmālo antivielu noteikšanai izmanto pēc pozitīva eksprestestu rezultāta (sensitivitāte 84% primārajam sifilisam un 100% citām stadijām, specifiskums 96%). Nav piemērojams diagnostikai jaundzimušajiem.

Dažas laboratorijas izmanto "reversās" skrīninga pārbaudes.

CDC (Centers for Disease Control and Prevention, ASV) iesaka veikt tradicionālos pētījumus, ko pārbauda ar kvantitatīviem ne-treponēmas testiem, ja rezultāts ir pozitīvs, tiek veikta ārstēšana.

Imunofluorescences reakcija (RIF)

Savāktajam materiālam tiek uzklāts serums ar fluorohromu iezīmētām treponēmas antigēnam specifiskām antivielām, patogēns piesaista pie sevis imūnkompleksus, kādēļ tas sāk mirdzēt luminiscējošā mikroskopā.

Pasīvā hemoaglutinācijas reakcija jeb RPHA

Pirms eritrocītu hemaglutinācijas (adhēzijas) parādīšanās ir jāpaiet vismaz 4 nedēļām no bālas treponēmas ievadīšanas brīža.

Sagatavoti eritrocīti ar fiksētām patogēna proteīnu frakcijām mijiedarbojas ar plazmu, ja ir antivielas pret sifilisu, notiek reakcija.

Piemērots jebkuras slimības stadijas apstiprināšanai.

Saistīts imūnsorbcijas tests

Tas ir balstīts uz antigēna-antivielu reakciju. Tiek atklātas dažādu klašu antivielas, kuras var kvantitatīvi noteikt.

Iegūtie rezultāti ļauj spriest par patoloģiskā procesa ilgumu, ārstēšanas panākumiem, imunoloģisko stāvokli, patogēnu aktivitāti.

Imunoblotēšana ir ELISA veids, ko izmanto padziļinātai diagnostikai ar visiem apšaubāmiem rezultātiem.

Jutīgums un specifiskums ir tuvu 100%, kas pašlaik ir īpaši jutīga metode proteīnu identificēšanai.

RIBT

Metodes pamatā ir antigēna-antivielu reakcija. Bālie treponēmi, kas kultivēti trušu sēkliniekos, kalpo kā antigēns. Mijiedarbojoties ar inficētas personas antivielām, patogēni zaudē savu mobilitāti. Reakciju novērtē, izmantojot tumšā lauka mikroskopiju.

Piezīme

Pašlaik RIBT lieto retāk tā darbietilpības dēļ, taču analīze var būt noderīga strīdīgu jautājumu risināšanā (viltus pozitīvas reakcijas uz sifilisu).

Diferenciāldiagnoze

Vislielākās grūtības sagādā terciārā sifilisa diagnoze, ko izraisa simptomi no sirds un asinsvadu un nervu sistēmas, kā arī izpausmes no ādas.

Pacienti ir jāpārbauda, ​​vai.

Mēs uzskaitām slimības, ar kurām tiek veikta diferenciāldiagnoze sifilisa gadījumā:

• dermatoloģiskas izpausmes;
• dzimumorgānu kārpas ();
• donovanoze;
• venereum limfogranuloma;
• vīruss;
• žāvas.

Kā sākas sifilisa diagnostika?

Sākotnēji ar pacientu tiek veikta saruna, kuras laikā tiek precizētas detaļas: kad bijis aizdomīgs dzimumkontakts un kādas ir sūdzības.

Pēc vēstures savākšanas viņi dodas uz fizisku pārbaudi, īpaša uzmanība tiek pievērsta dzimumorgānu un tūpļa zonai, gļotādām un limfmezgliem. Jau var veikt provizorisku diagnozi. Galīgā pārbaude tiek veikta, izmantojot laboratorijas testus.

Ja mēs sakām vienkārši par kompleksu, tad dažas analīzes identificē sifilisa izraisītāju, bet citas atspoguļo ķermeņa reakciju uz bālas treponēmas ieviešanu.

Lai noteiktu galīgo diagnozi, RPHA jāpapildina ar 1 treponēmālu un 1 ne-treponēmu analīzi.

Sifilisa diagnostika grūtniecēm

Obligātā sifilisa pārbaude grūtniecības laikā tiek veikta vairākas reizes.

Nosūtījums DAC analīzei tiek izsniegts sievietes pirmās vizītes laikā uz konsultāciju, un grūtniecības laikā pārbaude tiek veikta trīs reizes. Īpaši liela uzmanība nepieciešama augsta riska grupas pacientiem ar apgrūtinātu vēsturi: antisociāliem, atkarīgiem utt.

Ja testa rezultāti ir pozitīvi, tiek veikta dziļāka diagnoze, un saskaņā ar indikācijām tiek nozīmēta ārstēšana, kas ir atkarīga no stadijas un klīniskajām izpausmēm.

Iedzimta sifilisa diagnostika

Lielākā daļa bērnu piedzimst neārstētām mātēm vai tām, kuras terapiju saņēmušas pārāk vēlu.

Treponēmas testi, izmantojot jaundzimušo serumu, nav ieteicami IgG antivielu pasīvās pārneses dēļ. Visi bērni, kas dzimuši mātēm ar sifilisu, ir jāpārbauda ar kvantitatīvu netreponēmu seroloģisko testu (RPR vai VDRL), ko veic, izmantojot jaundzimušo serumu.

Kā interpretēt seroloģisko testu rezultātus

Mikronogulsnēšanās reakcija, RIF un RPHA ir negatīva - norma, pozitīva - sifilisa apstiprinājums.

Mikronogulšņu reakcija ir negatīva, pārējās pozitīvas - sifilisa anamnēzē pēc specifiskas terapijas, vai vēlīnā stadijā.

Negatīvs RIF ar pozitīvu RPHA un mikronogulsnēšanās reakciju - rezultāts apšaubāms, atkārtots kompleksais novērtējums.

Negatīvs RIF un mikroprecipitācijas rezultāts, bet pozitīvs RPHA ir stāvoklis pēc veiksmīgas antibiotiku terapijas vai kļūdaini pozitīva rezultāta.

Pozitīvs RIF ar negatīvām RPHA un mikroprecipitācijas reakcijām - agrīna stadija, ārstēšana vai rezultāta neuzticamība.

Pozitīva mikroprecipitācijas reakcija, ko neapstiprina ne RPHA, ne RIF, ir sifilisa neesamība.

Sifilisa instrumentālie pētījumi

Instrumentālā diagnostika tiek veikta atkarībā no orgānu iesaistes. Piemēram, vēderā var novērot granulomatozus aknu bojājumus.

Pacientiem ar terciāro sifilisu var būt aortas paplašināšanās. Lineāra kalcifikācija gar aortu liecina par sifilītisku aortītu.