इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया माइक्रोबायोलॉजी। इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया, प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीकों

1 9 42 में कुन्स द्वारा खोला गया, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया एक नई शोध विधि नहीं है। हालांकि, हाइब्रिडोमा टेक्नोलॉजीज के उद्भव ने मोनोक्लोनल एंटीबॉडी प्राप्त करने की इजाजत दी, ने इस प्रतिक्रिया का "दूसरा जीवन" दिया, क्योंकि उनके उपयोग ने इस प्रतिक्रिया और इसकी विशिष्टता की संवेदनशीलता बढ़ाने के लिए कई बार अनुमति दी।

और आज हम आपको गर्भावस्था के दौरान वयस्क पुरुषों और महिलाओं के लिए कुनों का निदान करने के लिए एक विधि के रूप में प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस (रीफ) की प्रतिक्रिया के बारे में विस्तार से बताएंगे।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया क्या है

एक सटीक निदान को तुरंत प्राप्त करने के लिए एक उत्कृष्ट अवसर का परिचय, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया रोगजनक सामग्री में बीमारी के एक कारक एजेंट की उपस्थिति को निर्धारित करना संभव बनाता है। इसके लिए, एक सामग्री का एक स्ट्रोक का उपयोग किया जाता है, जिसे विशेष रूप से लेबल वाले फिट्ज (फ्लोरोसिन इसोथियोसाइनेट) का उपयोग करके संसाधित किया जाता है, और इसका अध्ययन विषम विश्लेषण के रूप में किया जाता है।

नतीजे प्राप्त करने के लिए, एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाता है, इसकी ऑप्टिकल सिस्टम में एक नीली बैंगनी या पराबैंगनी प्रकाश के साथ एक तैयारी प्रदान करने के लिए प्रकाश फ़िल्टर का एक सेट होता है जो पूर्व निर्धारित तरंग दैर्ध्य होता है। यह स्थिति फ्लोरोक्रम को किसी दिए गए सीमा पर हटा दी जा सकती है। शोधकर्ता को चमक, उसके चरित्र, वस्तुओं के आकार और उनकी व्याख्या के गुणों का अनुमान लगाया जाता है।

जिसे यह निर्धारित किया गया है

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया वायरल बीमारियों के एक सेट के निदान में असाइन की जा सकती है। विशेष रूप से, इसे निम्नलिखित कारकों की पहचान करने के लिए एक व्यापक परीक्षा के साथ नियुक्त किया जाता है:

• वायरस के शरीर में उपस्थिति;
• साल्मोनेला संक्रमण;
• कुछ एंटीजन के शरीर में अस्तित्व;
• क्लैमिडिया, माइकोप्लाज्मास और अन्य सूक्ष्मजीवों के साथ संक्रमण की संभावना जो मानव वायरस रोगों को शुरू करने की क्षमता रखते हैं, पाए जाते हैं;
• जानवरों में वायरल बीमारियों का निदान।

मानव और पशु जीव में वायरल बीमारियों की पहचान करते समय ये संकेत इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया का उपयोग करने की अनुमति देते हैं।

लक्ष्यों को

चूंकि इस डायग्नोस्टिक विधि में कई फायदे हैं जिनके लिए इसका उच्च प्रदर्शन, गति और परिणाम प्राप्त करने के साथ-साथ बड़ी संख्या में contraindications की अनुपस्थिति, शरीर में वायरल संक्रमण की उपस्थिति द्वारा निर्धारित किया जाता है। इसलिए, इसे फॉर्मूलेशन के लिए और निदान को स्पष्ट करने के लिए इस विश्लेषण को सौंपा जा सकता है, जिसके आधार पर उपचार योजना नियुक्त की जाती है।

प्रक्रिया अप्रिय संवेदनाओं का कारण नहीं बनती है, विश्लेषण के लिए सामग्री प्राप्त करना आवश्यक है, जो किसी भी शरीर के तरल पदार्थ से लिया जाता है: लार, स्पुतम, श्लेष्म झिल्ली की सतह से स्क्रैपिंग। विश्लेषण के लिए भी रक्त हो सकता है। इम्यूनोफ्लोरस रिएक्शन फ्रीक्वेंसी एक डॉक्टर को असाइन करती है जिसे शरीर में होने वाली प्रक्रियाओं की गतिशीलता पर डेटा प्राप्त करने की आवश्यकता होती है।

चूंकि शरीर दोनों के लिए नुकसान और किसी व्यक्ति के सामान्य कल्याण के लिए इस विश्लेषण को नहीं लेता है, इसे आवश्यकतानुसार नियुक्त किया जा सकता है।

ऐसी प्रक्रिया के प्रकार

आज, इस विश्लेषण की कई किस्मों का उपयोग किया जाता है, जिनमें से प्रत्येक में कई विशिष्ट विशेषताएं हैं और आपको शरीर में होने वाली प्रक्रियाओं की सबसे तैनात तस्वीर प्राप्त करने की अनुमति देती है।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया की किस्मों में शामिल हैं:

1. - डायग्नोस्टिक्स के सबसे तेजी से विकासशील प्रकारों में से एक, यह विश्लेषण सीरियल dilutions के उपयोग के बिना मात्रात्मक डेटा प्राप्त करना संभव बनाता है। तरल पदार्थ की ऑप्टिकल घनत्व के प्राप्त माप के उपयोग के कारण, यह वांछित घटक की एकाग्रता के स्तर को सटीक रूप से निर्धारित करने के लिए निकलता है। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के अपने कार्यान्वयन के लिए उपयोग किए जाने पर इस प्रकार के विश्लेषण की व्यापक संभावनाओं का उपयोग किया जाता है, जो संक्रामक प्रक्रिया के चरण को निर्धारित करने की अनुमति देता है, इसकी तीखेपन;
2. डीएनए डायग्नोस्टिक्स - यह विधि न्यूक्लियोटाइड के पूरक बाध्यकारी पर आधारित है, जिसके लिए लार, रक्त, शराब, पानी, मुखर, बायोपेटैट्स, रक्त दोनों के लिए ऐसे तरल पदार्थों का उपयोग किया जा सकता है। यह विधि सबसे प्रभावी ढंग से आपको शरीर में पैपिलोमा वायरस की उपस्थिति की पहचान करने की अनुमति देती है, लेकिन कई आधुनिक परीक्षण प्रणाली कभी-कभी झूठी सकारात्मक और झूठे नकारात्मक परिणाम दे सकती हैं। उनके लिए विशिष्ट डीएनए का विश्लेषण करने के लिए प्रदूषित तरल पदार्थ नमूने हो सकते हैं, जिसकी उपस्थिति में घोंसला या कुल प्रकृति हो सकती है;
3. इम्यूनोक्रोमोटोग्राफी - पैथोलॉजिकल पर्यावरण और वायरस के शरीर में उपस्थिति निर्धारित करने की इस विधि की विशिष्टता लेबल वाले एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया के दौरान उपयोग की जानी चाहिए। डायग्नोस्टिक की इस विधि का उपयोग स्ट्रेप्टोकोसी समूहों ए के साथ-साथ निम्नलिखित प्रकार के क्लैमिडिया के साथ संक्रमण की गतिविधि की पहचान और डिग्री के लिए किया जाता है: क्लैमिकिट आर इनोटेक इंटरनेशनल, क्लीयरव्यू टीएम क्लैमिडिया ऑक्सॉयड। उच्चतम संभावित संवेदनशीलता, परीक्षण प्रणाली जो इस शोध पद्धति पर आधारित हैं। आमतौर पर एक संकेतक परीक्षण के रूप में लागू होता है।

सूचीबद्ध किस्मों में परिणामों की विशेषताएं और विशिष्ट विशेषताएं होती हैं, लेकिन उनमें से सभी का उद्देश्य शरीर में पैथोलॉजिकल सूक्ष्मजीवों और वायरस की उपस्थिति के साथ-साथ उनके प्रजनन और गतिविधि की डिग्री पर डेटा प्राप्त करना है।

होल्डिंग के लिए संकेत

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया किसी भी प्रकार के रोगजनक वातावरण के शरीर में पहचान करने के लिए असाइन की जा सकती है।

क्लैमिडिया, ट्राइकोमोनास, गोनोकोक्की और साथ ही साथ सभी प्रकार के गियर्डिया इस प्रकार के निदान के दौरान निर्धारित किए जाते हैं। और, और अन्य बीमारियों को भी रीफ की आवश्यकता होती है। इसके कार्यान्वयन के लिए डॉक्टर की नियुक्ति आवश्यक है।

धारण करने के लिए विरोधाभास

चूंकि अध्ययन के तहत सामग्री को पूरा करने के लिए अध्ययन की गई सामग्री के रूप में कोई प्रकार का शरीर तरल पदार्थ नहीं है, इसलिए आम तौर पर इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया को लागू करने के लिए कठिनाइयों और contraindications लेना मुश्किल नहीं है। हालांकि, गर्भावस्था और 6 महीने से कम उम्र के बच्चों के दौरान, अध्ययन के लिए सामग्री को अधिकतम सावधानियों के साथ किया जाता है।

विरोधाभासों की अनुपस्थिति आपको सभी रोगियों को डॉक्टर की नियुक्ति करते समय इस प्रकार के निदान को पूरा करने की अनुमति देती है। इसकी सुरक्षा को एक कीटाणुशोधन उपकरण और डिस्पोजेबल सिरिंज का उपयोग करके गारंटी दी जाती है।

प्रक्रिया के लिए तैयारी

इस विश्लेषण के लिए सामग्री लेने के लिए कोई विशेषताएं नहीं हैं। उसके लिए रक्त खाली पेट पर लिया जाता है, ताकि इसमें पदार्थों की कोई उच्च सामग्री न हो, जो वास्तविक गवाही बदल सकती है और झूठी तस्वीर दे सकती है।

कैसा है

चूंकि विश्लेषण करने के लिए विशेष तैयारी की आवश्यकता नहीं है, इसलिए दवाओं की अनुपस्थिति होने से 12 घंटे पहले केवल भोजन को बाहर रखा जाता है, अध्ययन के तहत सामग्री को विश्लेषण करने के लिए शरीर के तरल पदार्थ को लेने की सामान्य प्रक्रिया के रूप में लिया जाता है।

प्रक्रिया के दौरान व्यक्तिपरक संवेदना संवेदनशीलता के आधार पर भिन्न हो सकती है।

डिकोडिंग परिणाम

आधुनिक परीक्षण प्रणाली का उपयोग आपको सबसे सटीक विश्लेषण परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है। परिणाम डिक्रिप्ट करने के लिए निम्नलिखित डेटा लागू होता है:

• फ्लोरोसेंस की तीव्रता की डिग्री;
• प्रतिदीप्ति की छाया;
• वस्तु की वस्तु की वस्तु की परिधीय प्रकृति;
• मॉर्फोलॉजी की विशेषताएं, अध्ययन और इसके आयामों के तहत सामग्री के धुंध में कारक एजेंट का स्थान।

बड़े आकार के साथ वस्तुओं के अध्ययन के दौरान (उदाहरण के लिए, gorderell, trichomonas, कोशिकाएं जो पहले से ही वायरस द्वारा आश्चर्यचकित हैं) मानदंड के ऊपर सूचीबद्ध मानदंड के ऊपर सूचीबद्ध सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करना संभव बनाता है। हालांकि, माइकोप्लाज्मा और क्लैमिडिया के प्राथमिक निकायों में लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप के संकल्प की सीमा पर आयाम होते हैं, जो

एक सटीक परिणाम प्राप्त करना, क्योंकि परिधीय चमक इसकी तीव्रता का हिस्सा खो देती है। शेष मानदंड अध्ययनित सूक्ष्मजीवों को सटीक रूप से पहचानने के लिए पर्याप्त नहीं हैं। इस कारण से, इस प्रकार के अध्ययन का संचालन करने वाले विशेषज्ञों पर विशेष आवश्यकताएं लागू की जाती हैं: योग्यता का स्तर ऑपरेटिंग डेटा के लिए पर्याप्त होना चाहिए।

इस कारण से, योग्यता के उचित स्तर के साथ केवल एक डॉक्टर को विश्लेषण को डीकोड करने के साथ निपटाया जा सकता है। नीचे रीफ विधि के लिए कीमत पढ़ें।

औसत मूल्य

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया की कीमत इसके होल्डिंग और मेडिकल इंस्टीट्यूशन के स्तर के साथ-साथ विशेषज्ञ के संचालन विश्लेषण की योग्यता पर निर्भर करती है। आज, लागत 1280 से 2,160 रूबल तक है।

इम्यूनोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के बारे में अधिक जानकारी के लिए, वीडियो नीचे दिए गए वीडियो का नेतृत्व करेगा:

संख्या 35 इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया। तंत्र, घटक, आवेदन।
इम्यूनोफ्लोरेसेंट विधि (रीफ, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया, कुन्स रिएक्शन) - फ्लोरोक्रोमा के साथ संयुग्मित में विशिष्ट एजीएस का पता लगाने की विधि। इसमें उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता है।
इसका उपयोग संक्रामक बीमारियों (अध्ययन के तहत सामग्री में रोगजनक की पहचान) के तेजी से निदान के लिए किया जाता है, साथ ही साथ और सतह रिसेप्टर्स और ल्यूकोसाइट मार्कर (इम्यूनोफेनोटाइपिंग) और अन्य कोशिकाओं को निर्धारित करने के लिए भी किया जाता है।
संक्रामक सामग्रियों में जीवाणु और वायरल एंटीजन का पता लगाने, फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी (सीरम) की मदद से कोशिकाओं की कोशिकाओं और संस्कृतियों के ऊतकों ने नैदानिक \u200b\u200bअभ्यास में व्यापक उपयोग प्राप्त किया। फ्लोरोसेंट सीरम की तैयारी कुछ फ्लोरोक्रोम (उदाहरण के लिए, फ्लोरोसिसिन इसोथियोसाइनेट) की क्षमता पर आधारित है, सीरम प्रोटीन के साथ रासायनिक बंधन में शामिल होने के लिए,उनकी प्रतिरक्षा विशिष्टता को परेशान नहीं करना।
विधि की तीन किस्में हैं: पूरक के साथ, सीधे, अप्रत्यक्ष। प्रत्यक्ष रीफ विधि यह इस तथ्य पर आधारित है कि फ्लोरोच्रोमास लेबल वाले एंटीबॉडी के साथ प्रतिरक्षा सीरम के साथ इलाज ऊतक या माइक्रोबिक एंटीजन फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के यूवी-बीम में चमकने में सक्षम हैं। ऐसे लुमेनसेंट सीरम के साथ इलाज किए गए एक धुंध में बैक्टीरिया हरे रंग की सीमा के रूप में कोशिकाओं की परिधि के साथ चमक रहा है।
अप्रत्यक्ष रीफ विधि इसमें फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल किए गए सीरम के एंटी-ग्लोबुलिन (एंटीबॉडी के खिलाफ) की मदद से जटिल एंटीजन - एंटीबॉडी की पहचान करने में शामिल है। इसके लिए, सूक्ष्मजीवों के निलंबन से स्ट्रोक को एंटीमिक्राबियल खरगोश डायग्नोस्टिक सीरम एंटीबॉडी के साथ माना जाता है। फिर एंटीबॉडी जो माइक्रोबियल एंटीजन के विपरीत नहीं हैं, धोया जाता है, और सूक्ष्मजीवों पर शेष एंटीबॉडी प्रकट होते हैं, जो फ्लोरोक्रोमास के साथ एंटी-ग्लोबुलिन (एंटी-साइकलिंग) सीरम के स्मीयर का इलाज करते हैं। नतीजतन, माइक्रोबेब कॉम्प्लेक्स का गठन किया गया है + एंटीमाइक्रोबायल खरगोश एंटीबॉडी + फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल वाले एंटी-साइकलिंग एंटीबॉडी। यह परिसर एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप, साथ ही सीधे विधि के साथ मनाया जाता है।
तंत्र । परीक्षण सामग्री से एक स्ट्रोक इस विषय के गिलास पर तैयार किया जाता है, जो लौ पर तय किया जाता है और इसे प्रतिरक्षा खरगोश सीरम के साथ इलाज एजेंट एंटीजनों के खिलाफ एंटीबॉडी युक्त किया जाता है। एंटीजन कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए - एंटीबॉडी, दवा को गीले कक्ष में रखा जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं 15 मिनट के लिए, जिसके बाद यह एंटीजन के साथ संपर्क नहीं किया गया एंटीबॉडी को हटाने के लिए सोडियम क्लोराइड आइसोटोनिक समाधान के साथ पूरी तरह से धोया जाता है। फिर, दवा को खरगोश ग्लोबुलिन के खिलाफ फ्लोरोसेंट एंटी-ग्लोबुलिन सीरम के साथ लागू किया जाता है, जो 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट तक रखा जाता है, और फिर दवा को सोडियम क्लोराइड आइसोटोनिक समाधान के साथ अच्छी तरह से धोया जाता है। एंटीजन-निश्चित एंटीजन के साथ फ्लोरोसेंट एंटीहोग्लोबुलिन सीरम बाध्यकारी के परिणामस्वरूप, चमकदार एंटीजन परिसरों का गठन किया जाता है, जो चमकदार माइक्रोस्कोपी में पाए जाते हैं।

61. Immunofluorescence प्रतिक्रिया। तंत्र, घटक, आवेदन। उत्पादन के प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीके।

विधि की तीन मुख्य किस्में हैं: पूरक के साथ, सीधे, अप्रत्यक्ष (चित्र 13.10)। कुन्स प्रतिक्रिया सूक्ष्मजीवों या एंटीबॉडी परिभाषाओं का पता लगाने के लिए एक एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक विधि है।

प्रत्यक्ष रीफ विधि यह इस तथ्य पर आधारित है कि फ्लोरोकोरोक्रोमास लेबल वाले एंटीबॉडी के साथ प्रतिरक्षा सीरम के साथ इलाज ऊतकों या सूक्ष्म जीवों की एंटीजन फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की यूवी-रे में चमकने में सक्षम हैं। ऐसे लुमेन सीरम के साथ इलाज किए गए एक धुंध में पैकरीज़ परिधि के साथ चमक रहे हैं एक हरे रंग के कंघी के रूप में कोशिकाएं।

अप्रत्यक्ष रीफ विधि यह फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल किए गए सीरम के एंटी-ग्लोबुलिन (एंटीबॉडी के खिलाफ) की मदद से एंटीजन एंटीजन कॉम्प्लेक्स की पहचान करना है। इसके लिए, सूक्ष्मजीवों के निलंबन से स्ट्रोक को डायग्नोस्टिक सीरम के एंटीमिक्राबियल खरगोश खरगोश एंटीबॉडी के साथ माना जाता है। फिर एंटीबॉडी जो माइक्रोबियल एंटीजन के विपरीत नहीं हैं, धोया जाता है, और सूक्ष्मजीवों पर शेष एंटीबॉडी प्रकट होते हैं, जो फ्लोरोक्रोमास के साथ एंटी-ग्लोबुलिन (एंटी-साइकलिंग) सीरम के स्मीयर का इलाज करते हैं। नतीजतन, माइक्रोबेब कॉम्प्लेक्स का गठन किया गया है + एंटीमाइक्रोबायल खरगोश एंटीबॉडी + फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल वाले एंटी-साइकलिंग एंटीबॉडी। यह परिसर एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप, साथ ही सीधे विधि के साथ मनाया जाता है।

एक लेबल के रूप में, फ्लोरोक्रोमा डाईज़ चमकते हुए (इसोथियोसाइनेट फ्लोरिसिसिन इत्यादि) का उपयोग किया जाता है।

रीफ के विभिन्न संशोधन हैं। संक्रामक बीमारियों के तेजी से निदान के लिए - अध्ययन के तहत सामग्री में सूक्ष्म जीवों या उनके एंटीजन का पता लगाने के लिए, कुन्सु पर रीफ का उपयोग किया जाता है।

कुंसु में रीफ के दो तरीके हैं: सीधे और अप्रत्यक्ष।

घटक प्रत्यक्ष रीफ:
1) अध्ययन के तहत सामग्री (नासोफरीन्क और अन्य लोगों द्वारा अलग फूलदान);
2) वांछित एंटीजन के लिए एटी-ला युक्त विशिष्ट प्रतिरक्षा सीरम लेबल;
3) आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान।
अध्ययन के तहत सामग्री से धुंध को लेबल वाले एंटीसेम के साथ माना जाता है।
एजी-रिएक्शन होता है। उस साइट पर एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोपिक परीक्षा के साथ जहां एजी-ऑन कॉम्प्लेक्स स्थानीयकृत होते हैं, फ्लोरोसेंस का पता लगाया जाता है - चमक।

घटक अप्रत्यक्ष रीफ:
1) अध्ययन के तहत सामग्री;
2) विशिष्ट एंटी-ग्रेडर;
3) एंटी-ग्लोबुलिन सीरम (इम्यूनोग्लोबुलिन के खिलाफ एटी-ला), फ्लोरिच्रोम के साथ हंसते हुए;
4) सोडियम क्लोराइड आइसोटोनिक समाधान।

अध्ययन के तहत सामग्री के स्ट्रोक को पहले इम्यून सीरम के साथ वांछित एंटीजन के साथ इलाज किया जाता है, और फिर - एंटीहग्लोबुलिन सीरम लेबल किया जाता है।

चमकदार परिसरों एजी-एटी - लेबल किए गए एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग करके पता चला है।
अप्रत्यक्ष विधि का लाभ यह है कि फ्लोरोसेंट विशिष्ट सेरा का एक विस्तृत सेट तैयार करने की कोई आवश्यकता नहीं है, और केवल एक फ्लोरोसेंट एंटी-ग्लोबुलिन सीरम का उपयोग किया जाता है।

पूरक (सीरम गिनी पिग) के अतिरिक्त अप्रत्यक्ष रीफ की एक 4-घटक विविधता को भी अलग किया गया है। सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, एजी-ऑन कॉम्प्लेक्स का गठन होता है - लेबल-एटी-पूरक।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस रिएक्शन (रीफ, कुन विधि) यह सूक्ष्मजीवों या एंटीजन परिभाषाओं का पता लगाने के लिए एक एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक विधि है। रीफ उपयोग पर आधारित है fluoresceaniciocyanate¾ एफआईटीसीया अन्य फ्लोरोक्रोम, रासायनिक रूप से संबंधित के साथ संयुग्मित। साथ ही, लेबल वाले एटीएस प्रतिरक्षा विशिष्टता को बनाए रखते हैं और सख्ती से परिभाषित कॉर्पस्क्यूलर एजी के साथ बातचीत में संलग्न होते हैं।

विधि की दो मुख्य किस्में हैं: सीधे और अप्रत्यक्ष।

प्रत्यक्ष रीफ विधियह इस तथ्य पर आधारित है कि फ्लोरोच्रोमास लेबल वाले एंटीबॉडी के साथ विशिष्ट सीरम के साथ इलाज ऊतक या माइक्रोबिक एंटीजन फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की यूवी किरण में चमकने में सक्षम हैं। एक धुंध में बैक्टीरिया, इस तरह के लुमेनसेंट सीरम के साथ इलाज, एक हरे या पीले सीमा के रूप में कोशिकाओं की परिधि के माध्यम से चमक रहे हैं।

अप्रत्यक्ष विधि rnifयह फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल किए गए सीरम के एंटी-ग्लोबुलिन (एंटीबॉडी के खिलाफ) की मदद से एंटीजन एंटीजन कॉम्प्लेक्स की पहचान करना है। इसके लिए, अध्ययनित माइक्रोब्स के स्मीयर को एंटीमिक्राबियल खरगोश डायग्नोस्टिक सीरम एंटीबॉडी के साथ माना जाता है। फिर एंटीबॉडी जो माइक्रोबियल एंटीजन के विपरीत नहीं हैं, धोया जाता है, और सूक्ष्मजीवों पर शेष एंटीबॉडी प्रकट होते हैं, जो फ्लोरोक्रोमास के साथ एंटी-ग्लोबुलिन (एंटी-साइकलिंग) सीरम के स्मीयर का इलाज करते हैं। नतीजतन, माइक्रोबेब कॉम्प्लेक्स का गठन किया गया है + एंटीमाइक्रोबायल खरगोश एंटीबॉडी + फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल वाले एंटी-साइकलिंग एंटीबॉडी। यह परिसर एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप, साथ ही सीधे विधि के साथ मनाया जाता है।

तंत्र, इम्यूनोसे विश्लेषण (एलिसा), अवयवों के आवेदन का उद्देश्य

ठोस चरण एपिसोडयह एलिसा का सबसे आम संस्करण है, जब प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया (एंटीजन या एंटीबॉडी) के घटकों में से एक ठोस वाहक पर एक ठोस वाहक पर solbed किया जाता है, उदाहरण के लिए, पॉलीस्टीरिन माइक्रोप्रेट (चित्र 27) के छेद में। जब सिर वाले एंटीजनों के साथ माइक्रोप्रेट के कुएं में एंटीबॉडी निर्धारित करते हैं, सीरम अनुक्रमिक रूप से रोगी के सीरम, एंजाइम द्वारा लेबल एंजाइम द्वारा लेबल एंटी-ग्लोबुलिन सीरम, एंजाइम (एच 2 ओ 2 या फॉस्फेटिड) और क्रोमोजेन (सूचक, पेंटिंग किण्वन उत्पाद) के लिए एक सब्सट्रेट जोड़ा जाता है )। छेद से अगले घटक जोड़ने के बाद हर बार, निष्पक्ष अभिकर्मकों को rinsing द्वारा हटा दिया जाता है। सकारात्मक परिणाम के साथ, क्रोमोजेन समाधान का रंग बदल जाता है। ठोस चरण वाहक न केवल एक एंटीजन द्वारा, बल्कि एंटीबॉडी भी संवेदनशील हो सकता है। फिर सेना एंटीजन को सोर्स्ड एंटीबॉडी के साथ कुओं में पेश किया गया है, प्रतिरक्षा सीरम एंटीजन के खिलाफ जोड़ा जाता है, एंजाइम द्वारा लेबल किया जाता है, और फिर एंजाइम और क्रोमोजेन के लिए सब्सट्रेट जोड़ा जाता है।

अंजीर। 27. एंटीमाइक्रोबायल एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एलिसा करने का सिद्धांत

तंत्र, रेडियोमुनल विश्लेषण (आरआईए) के अवयव

रेडियोमीमोनोलॉजिकल विश्लेषण (आरआईए)¾ एंटीजन एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया के आधार पर एंटीजन एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया के आधार पर एंटीजन या एंटीबॉडी के उपयोग के साथ रेडियोसोट्रॉप (एल 25 जे, 14 सी, 3 एच, 51 सीआर, आदि) के साथ लेबल किए गए। उनकी बातचीत के बाद, परिणामी रेडियोधर्मी प्रतिरक्षा परिसर अलग हो गया है और इसकी रेडियोधर्मिता संबंधित मीटर (बीटा या गामा-विकिरण) में निर्धारित की जाती है: विकिरण तीव्रता सीधे एंटीजन अणुओं और एंटीबॉडी की संख्या के लिए आनुपातिक है। प्रतिक्रिया (एंटीजन या एंटीबॉडी) के घटकों से रियाओोडीन के ठोस चरण संस्करण के साथ, एक ठोस वाहक पर soldbed, उदाहरण के लिए, polystyrene micropanes के कुओं में। विधि ¾ प्रतिस्पर्धी आरआईए के एक अलग संस्करण के साथ, रेडियोन्यूक्लाइड के साथ लेबल किए गए एंटीजन एक दूसरे के साथ प्रतिरक्षा सीरम एंटीबॉडी की सीमित संख्या के बाध्यकारी के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं। इस विकल्प का उपयोग अध्ययन के तहत सामग्री में एंटीजन की मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है। सूक्ष्म जीवों की एंटीजन की पहचान करने के लिए, हार्मोन, एंजाइम, औषधीय पदार्थों और इम्यूनोग्लोबुलिन, साथ ही साथ अन्य पदार्थों को कम सांद्रता पर अध्ययन के तहत सामग्री में निहित अन्य पदार्थ ¾ 10 -10 -10 -12 जी / एल।

प्रयोगशाला डायग्नोस्टिक्स सबसे सटीक परिणाम प्राप्त करने के लिए एक बार में कई सिफिलिस परीक्षणों का उपयोग करता है। इसमें अधिक समय लगता है, लेकिन यह सबसे सटीक जवाब देता है।

अक्सर, रीफ विश्लेषण का नतीजा गिना जाता है। डिकोडिंग में निम्नलिखित नोटेशन है:

• एक तेजी से सकारात्मक परिणाम 4 प्लस (++++) द्वारा दर्शाया गया है;
• एक सकारात्मक परिणाम 3 प्लस (+++) द्वारा इंगित किया जाता है;
• कमजोर सकारात्मक परिणाम 2 प्लस (++);
• संदिग्ध परिणाम 1 प्लस (+);
• एक नकारात्मक परिणाम 1 शून्य (-) द्वारा दर्शाया गया है।

सिफलिस पर रीफ का नतीजा भी एक प्रतिशत के रूप में प्रस्तुत किया जाता है जो बाध्य बैक्टीरिया के मात्रात्मक संकेतक पर निर्भर करता है:

• नकारात्मक परिणाम के साथ, 20% तक immobilization;
• कमजोर जमीनी परिणाम के साथ, immobilization 20 से 50% तक भिन्न होता है;
• सकारात्मक परिणाम के साथ, immobilization 50% से ऊपर है।

यदि परिणाम जारी किया गया सकारात्मक उत्तर, यह एक बीमारी की उपस्थिति बताता है।

यदि परिणाम कमजोर बेडरूमयह रक्त में अवशिष्ट एंटीबॉडी की एक ही मात्रा को इंगित करता है।

नकारात्मक नतीजा पीला ट्रेपोनम की अनुपस्थिति को इंगित करता है, जिसका अर्थ है कि रोगी स्वस्थ है।

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